磺基水楊酸淺析蛋白濃度的正確檢測方法
    對很多人來說，檢測蛋白質(zhì)的濃度真實不是多困難的實驗。但有時我們也不能太過自傲，由于即使簡略的方法都有其凌亂的機理。為了協(xié)助大家選擇正確而且簡略的方法測定蛋白質(zhì)的濃度，磺基水楊酸在這里簡略介紹下幾種常用的蛋白質(zhì)含量測定方法的原理及注意事項。
一、蛋白濃度檢測方法
1、雙縮脲法
   檢測原理：雙縮脲是由兩分子尿素縮合而成的化合物，在堿性溶液中與硫酸銅反應(yīng)生成紫赤色絡(luò)合物，此反應(yīng)即為雙縮脲反應(yīng)。含有兩個或兩個以上肽鍵的化合物都具有雙縮脲反應(yīng)。蛋白質(zhì)含有多個肽鍵，在堿性溶液中能與Cu2+絡(luò)組成紫赤色化合物（540nm）。其顏色深淺與蛋白質(zhì)的濃度成正比。
2、Lowry法
   檢測原理：Lowry法是雙縮脲法與福林酚法的結(jié)合與開展。Lowry法的包括兩步反應(yīng)，一步是在堿性條件下，雙縮脲試劑（堿性銅試劑），可與蛋白質(zhì)中的肽鍵其顯色反應(yīng)，生成蛋白質(zhì)-銅絡(luò)合物；二步是此絡(luò)合物將Folin試劑（磷鎢酸和磷鉬酸混合液）還原成鉬藍和鎢藍混合物而呈藍色反應(yīng)，顏色深淺與蛋白質(zhì)含量成正比。

3、BCA法
   檢測原理：BCA與二價銅離子的硫酸銅等其他試劑組成的試劑混合一同即成為蘋果綠，即BCA作業(yè)試劑。在堿性條件下，BCA與蛋白質(zhì)結(jié)合時，蛋白質(zhì)將Cu2+還原為Cu+，作業(yè)試劑由本來的蘋果綠色變?yōu)樽纤{色絡(luò)合物。562nm下其光吸收強度與蛋白質(zhì)濃度成正比。
4、Bradford法
   檢測原理：考馬斯亮藍法測定蛋白質(zhì)濃度，是利用蛋白質(zhì)―染料結(jié)合的原理，定量測定微量蛋白濃度快速、活絡(luò)的方法。考馬斯亮藍G-250染料具有赤色和青澀兩種顏色、在酸性溶液中游離情況下為棕赤色，當它通過疏水作用與蛋白質(zhì)結(jié)合后變成藍色，使染料的盡量吸收峰的方位，由465nm變?yōu)?95nm，通過測定595nm處光吸收的增加量可知與其結(jié)合蛋白質(zhì)的量。
5、紫外分光光度法
    檢測原理：蛋白質(zhì)中的酪氨酸和色氨酸殘基的苯環(huán)中含有共軛雙鍵，因此，蛋白質(zhì)具有吸收紫外光的性質(zhì)，其盡量吸收峰位于280nm鄰近。盡量吸收波利益，吸光度與蛋白質(zhì)溶液的濃度遵守郎伯-比爾規(guī)律。
6、磺基水楊酸法
   磺基水楊酸檢測原理：蛋白質(zhì)為兩性物質(zhì)，在酸性環(huán)境中帶正電荷，而磺基水楊酸根帶負電，正好與蛋白質(zhì)結(jié)合沉積，顯現(xiàn)液體中有蛋白存在。該方法是以濁度為變數(shù)測定蛋白質(zhì)含量的，蛋白質(zhì)濃度與濁度成正比。